Статья журнала

DOI: 10.47026/2413-4864-2022-2-15-22

Ильина Л.Ю., Козлов В.А., Сапожников С.П.

Реакция фибробластов, тучных клеток и коллагена печени на формирование экспериментального амилоидоза

Ключевые слова: амилоидоз, тучные клетки, фибробласты, коллаген, печень, мыши

Целью исследования была количественная оценка реакции фибробластов, тучных клеток и коллагена печени на формирование экспериментального амилоидоза.

Материал и методы. Все мыши содержались на стандартном рационе вивария. Подопытным мышам формировали амилоидоз подкожным введением соевого заменителя сливок. Интактные мыши (ИГ – 3 особи) и группа внутреннего контроля развития амилоидоза (КМ – 3) получали воду в режиме свободного доступа. Мышам второй (ВМ – 3) и третьей групп (ВФМ – 3) воду на фоне формирующегося амилоидоза заменяли на сухое красное виноградное вино «Каберне-Совиньон» (Крым) с содержанием этилового спирта – 10–12º, сахара – 5–10 мг/ дм³. Кроме того, в вино группы ВФМ добавляли фруктозу 5 г/100 мл вина. Для оценки относительной площади свободных от амилоида коллагеновых волокон депарафинированные срезы печени окрашивали по трехцветной методике В.А. Козлова и др. (2017), для оценки относительной площади амилоидных отложений и подсчета фибробластов (ФБ) – гематоксилином и конго красным, выявления тучных клеток (ТК) и оценки их функциональности – по методу Унна. Функциональное состояние ТК оценивали по индексу дегрануляции (ИД) и предложенному нами ранее индексу сульфатирования (ИС). Полученные численные данные использовали для расчета новой статистической величины – индекса ТК/ФБ. Данные представлены в виде средних и медианных значений с указанием процентилей 10 и 90. Различия групп определены с помощью z‑теста. Различия медианных значений определяли с помощью F-теста.

Результаты и их обсуждение. Срезы печени интактных мышей соответствовали гистологической норме. Относительная площадь амилоида в срезах печени группы КМ составила 15,2±2,26%, группы ВМ – 1,9±2,1 и группы ВМФ – 2,5±2,9% (p = 0,0000). Относительная площадь свободных от амилоида коллагеновых волокон у ИГ – 0,50±0,18%, КМ – 0,11±0,03 (p = 0,0151), ВМ – 0,51±0,16 и ВМФ – 0,69±0,18%. ИД у ИГ – 0,38±0,19, КМ – 0,39±0,2, ВМ – 0,55±0,09, ВМФ – 1,03±0,19 (p = 0,0065 к ИГ). ИС у ИГ – 0,57±0,19, КМ – 0,38±0,2, ВМ – 0,54±0,09, ВМФ – 1,23±0,17 (p = 0,0051 к ИГ). Медианные значения числа ТК в ИГ – 0,8 (0,5¸1,3), КМ – 0,4 (0,3¸0,5), ВМ – 3,0 (2,0¸3,7), ВМФ – 2,0 (1,3¸3,0), к ИГ р < 0,05 во всех случаях. Медианные значения числа ФБ в ИГ – 35,3 (29,9¸39,9), КМ – 40,1 (26,1¸55,4), ВМ – 28,6 (20,3¸33,7), к ИГ р < 0,05 во всех случаях, ВМФ – 51,3 (46,2¸55,4), р > 0,5. Медианные значения индекса ТК/ФБ в ИГ – 0,022 (0,013¸0,038), КМ – 0,009 (0,007¸0,012), р = 0,0000, ВМ – 0,11 (0,063¸0,167), р = 0,0012, ВМФ – 0,037 (0,024¸0,06).

Выводы. При формировании экспериментального амилоидоза в печени мышей происходит уменьшение числа ТК с параллельным увеличением числа ФБ в поле зрения. Замещение в рационе мышей воды на сухое красное виноградное вино тормозит развитие изменений, характерных для экспериментального амилоидоза, индуцируемого соевым заменителем сливок. Новая статистическая величина индекс ТК/ФБ отражает как тяжесть амилоидного поражения печения, так и эффективность профилактических мероприятий в виде замещения воды на вино.

Литература

  1. Артишевский А.А., Леонтюк А.С., Слука Б.А. Гистология с техникой гистологических исследований. Минск: Высш. шк., 1999. 236 с.
  2. Ильина Л.Ю., Кириллов А.А., Максимов А.Г. Морфологические изменения печени белых мышей с экспериментальным амилоидозом // Сб. науч. тр. молодых учен. и спец.: в 2 ч / отв. ред. А.Н. Захарова. Чебоксары, 2019. С. 219–224.
  3. Ильина Л.Ю., Сапожников С.П., Козлов В.А., Дьячкова И.М., Гордова В.С. Количественная оценка сульфатирования тучных клеток // Acta Medica Eurasica. 2020. № 2. С. 4–
  4. Ильина Л.Ю., Козлов В.А., Сапожников С.П. Мегакариоциты селезёнки при экспериментальном амилоидозе и воздействии красного вина // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2021. Т. 172, № 11. С. 639–642.
  5. Козлов В.А., Сапожников С.П., Карышев П.Б. Модель системного амилоидоза у молодых мышей // Бюлл. эксперим. биол. и мед. Т. 162, № 10. С. 523–527. DOI: 10.1007/s10517-017-3652-y.
  6. Козлов В.А., Сапожников С.П., Карышев П.Б. Трехцветная окраска на амилоид // Цитология. 2017. Т. 59, № 9. С. 623–627. DOI: 10.1134/S1990519X18010121.
  7. Линднер Д.П., Поберин И.А., Розкин М.Я., Ефимов В.С. Морфометрический анализ популяции тучных клеток // Арх. патол. № 6. С. 60–64.
  8. Прокопчик Н.И. Характеристика амилоидоза печени и других органов по данным аутопсий // Гепатология и гастроэнтерология. 2017. № 1. С. 80–84.
  9. ФуфаеваА.И., Козлов В.А., Сапожников С.П. Клеточная реакция на алкоголь в условиях формирования модели амилоидоза // Acta Medica Eurasica. 2020. №1. С. 29–
  10. Шептулина А.Ф., Некрасова Т.П., Ивашкин В.Т. Пациентка 54 лет с кожным зудом и геморрагической сыпью // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2015. № 6. С. 110–117.
  11. Anekonda T.S. Resveratrol – a boon for treating Alzheimer’s disease? Brain Res. Rev., 2006, vol. 52, no. 2, pp. 316–326.
  12. Baker K.R., Rice L. The amyloidosis: clinical features, diagnosis and treatment. Methodist DeBakey Cardiovasc. J., 2012, 8, no 3, pp. 3–7. DOI: 10.14797/mdcj-8-3-3.
  13. Bathon J.M., Martin R.W., Fleischmann R.M., Tesser J.R., Schiff M.H., Keystone E.C., Genovese M.C., Wasko M.C., Moreland L.W., Weaver A.L., Markenson J., Finck B.K. A comparison of etanercept and methotrexate in patients with early rheumatoid arthritis. Engl. J. Med., 2000, vol. 343, no. 22, pp. 1586–1593. Doi: 10.1056/NEJM200011303432201.
  14. Bely M., Makovitzky J. Sesitivityand specificity of Congo red staining according to Romhanyi. Comparison with Puchtler´sor Bennhold´s methods. Acta Histohem., 2006, no 108, pp. 175–180. DOI: 10.1016/j.acthis.2006.03.017.
  15. Caruana M., Cauchi R., Vassallo N. Putative Role of Red Wine Polyphenols against Brain Pathology in Alzheimer’s and Parkinson’s Disease. Front Nutr., 2016, no.3, 31  DOI: 10.3389/fnut.2016.00031.
  16. Ilyina L.Y., Kozlov V.A., Sapozhnikov S.P. Hepatic Mast Cells in Mice with Experimental Amyloidosis. Bulletin of Experimental Biology and Medicine., 2019, vol. 168, no. 1, pp. 14–17. DOI 10.1007/s10517-019-04635-5.
  17. Kuroiwa M., Aoki K., Izumiyama N. Histologikal study of experimental murine AA amyloidosis. Electron. Microsc. [Tokyo], 2003, vol. 52, no. 4, pp. 407–413.
  18. Makhlouf H.R., Goodman Z.D. Globular hepatic amyloid: an early stage in the pathway of amyloid formation: a study of 20 new cases. J. Surg. Pathol., 2007, vol. 31, no 10, pp. 1615–1621. DOI: 10.1097/PAS.0b013e318054e6b6.
  19. Relini A., DeStefano S., Torrassa S., Cavalleri O., Rolandi R., Gliossi A., Giorgetti S., Raimondi S., Marchese L., Verga L., Rossi A., Stoppini M., Bellotti V. Heparin strongly enhances the formation of beta2-microglobulin amyloid fibrils in the presens of type I collagen. Biol. Chem., 2008, no. 283, pp. 4912–4920. DOI: 10.1074/jbc.M702712200.
  20. Shirahama T., Miura K., Ju S.T., Kisilevsky R., Gruys E., Cohen A.S. Amyloid enhancing factor-loaded macrophages in amyloid fibril formation. Lab Invest., 1990, vol. 62, no. 1, pp. 61–68.
  21. Tao Du, Ali-Khan Z. Pathogenesis of secondary amyloidosis in an alveolar hydatid cyst-mouse model: histopathology and immuno/enzyme-histohemical analysis of splenic marginal zone cells during amyloidogenesis. Exp. Path., 1990, vol. 71, pp. 313–335.

Сведения об авторах

Ильина Лилия Юрьевна
старший преподаватель кафедры медицинской биологии с курсом микробиологии и вирусологии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары (lileaceae@rambler.ru; ORCID: https://orcid.org/0000-0002-1257-2220)
Козлов Вадим Авенирович
доктор биологических наук, кандидат медицинских наук, профессор кафедры медицинской биологии с курсом микробиологии и вирусологии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары (pooh12@yandex.ru; ORCID: https://orcid.org/0000-0001-7488-1240)
Сапожников Сергей Павлович
доктор медицинских наук, заведующий кафедрой медицинской биологии с курсом микробиологии и вирусологии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары (adaptogon@mail.ru; ORCID: https://orcid.org/0000-0003-0967-7192)

Ссылка на статью

Ильина Л.Ю., Козлов В.А., Сапожников С.П. Реакция фибробластов, тучных клеток и коллагена печени на формирование экспериментального амилоидоза [Электронный ресурс] // Acta medica Eurasica. – 2022. – №2. – С. 15-22. – URL: http://acta-medica-eurasica.ru/single/2022/2/3/. DOI: 10.47026/2413-4864-2022-2-15-22.